細胞凍存液的保存條件是什么？
更新時間：2023-05-11 點擊次數：2787次
細胞凍存是一種常見的細胞保存方法，涉及將細胞在低溫下冷凍保存以延長其壽命。
1、凍存液的配制
配制通常包括三種核心成分：凝血酸鈉、DMSO和細胞培養基。其中凝血酸鈉的濃度應為2.5g/L，DMSO的濃度應為10%(/v)，而細胞培養基的組成則根據需要進行調整。
2、細胞的收集和處理
在進行細胞凍存之前，需要確保細胞處于最佳狀態。這通常包括在合適的生長條件下培養細胞，并確保它們處于對數生長期。在凍存之前，需要用無菌PBS或胰酶等化學物質將細胞從培養瓶中剝離并洗滌。
3、凍存管的選擇
選擇合適的凍存管也很重要。一般來說，推薦使用聚丙烯酸(PP)管，因為它們具有較高的耐凍性，并且不會導致細胞損傷。
4、冷凍過程
在將細胞放入凍存管之前，需要將其預先冷藏至4℃。然后，將細胞和凍存液混合在一起，并將混合物緩慢地加入凍存管中。隨著混合物的添加，可以使用差壓管來從管中抽出空氣，以防止產生氣泡影響冷凍效果。最后，在-80℃或液氮中快速冷凍樣品。
5、保存條件
一旦細胞成功凍存，它們應當存儲在-80℃或液氮中。若使用液氮，則需確保標簽明確容器的身份，并嚴格控制其溫度以避免液氮瓶內壓力升高，打開時造成安全問題。
總而言之，細胞凍存是一種有效的細胞保存方法，但需要遵循正確的配制、處理和保存條件才能保證成功。只有在正確執行了上述步驟后，才能確保細胞在保存期間不受到任何質量損失。
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